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lonza无血清培养基-gibco无血清培养基-无血清培养基基本配方
干细胞搜网 / 2014-10-17

Lonza公司是瑞士上市公司,全球制药,医疗保健和生命科学产业领先的领先供应商之一,是以生命科学为导向的化工及生物技术公司,旗下26家研究机构和市场部门遍布全球各地。Lonza公司的Bioscience生命科学部拥有一系列细胞产品、细胞培养检测产品、内毒素检测产品和细胞治疗工业化产品。

 

    X-VIVO™造血细胞的专用无血清培养基为淋巴激活杀伤细胞(LAK细胞)、外周血淋巴细胞(PBL)与肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)提供完整的营养和平衡生长环境。不包含任何外源性生长因子,人工刺激细胞增殖器,或不明确的添加剂。没有任何的蛋白激酶C刺激,适合人和小鼠淋巴细胞的第二信使系统激活的检测。配方是完整并含药物级别的人白蛋白、重组人胰蛋白酶及人转铁蛋白。X-VIVO™系列培养基的管理档案均已在FDA备案!

 


1、X-VIVO™10 限定化学成分无血清造血细胞培养基
X-VIVO™ 10为LAK细胞在无血清环境传代而设计。原来的方法是在每ml rIL-2 1000Cetus单位孵化1.0 - 3.0 × 106cells/ml病人或正常的捐赠者外周血淋巴细胞3天。在含rIL-2为100 – 1,000Cetus 单位孵化3-10天后,当外周血淋巴细胞密度 1.0 - 6.0 × 106cells/ml就获得了优化的LAK细胞。X-VIVO™ 10可以不同形式(1x)供应。
2、X-VIVO™15 限定化学成分无血清造血细胞培养基
X-VIVO™ 15培养基成分与X-VIVO™ 10相似,已在无血清环境下优化TIL增殖。X-VIVO™ 15培养基支持由外周血和人肿瘤分离纯化的CD3 +细胞的增殖,也可用来维持人单核细胞,巨噬细胞及细胞系,淋巴细胞,粒细胞和自然杀伤(NK)细胞生长。此外,X-VIVO™ 15培养基为扩大HUT-78和相关的人类淋巴细胞系提供一个无血清环境。
3、X-VIVO™20 限定化学成分无血清造血细胞培养基
X-VIVO™ 20 经过改进和优化从而支持从贫化单核细胞PBL细胞制备LAK细胞。最初的细胞密度2.0 - 3.0 × 107cells/ml可用来成功的用于LAK细胞的制备。X-VIVO™ 20培养基也可作为PBL和TIL生长培养基。

应 用:
- 外周血淋巴细胞(PBL)的增殖
- 肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的增殖
- 器官的冰冻保存和移植
- 人单核细胞和巨噬细胞的培养
- 树突状细胞(Dendritic cells)的培养

订购信息如下:
目录号   品 名
04-380Q X-VIVO™ 10 含L-谷氨酰胺, 庆大霉素, 酚红, 1 L
04-743Q X-VIVO™ 10 含L-谷氨酰胺, 不含庆大霉素, 酚红, 1 L
04-418Q X-VIVO™ 15 含L-谷氨酰胺, 庆大霉素, 酚红, 1 L
04-744Q X-VIVO™ 15 含L-谷氨酰胺, 不含庆大霉素, 酚红, 1 L
04-448Q X-VIVO™ 20 含L-谷氨酰胺, 庆大霉素, 酚红, 1 L

 

gibco无血清培养基


Serum-free media (SFM) allow researchers to grow a specific cell type or perform a specific application in the absence of serum.

使用无血清培养基的优点包括:

更方便的纯化及下游加工处理
对细胞功能的精确评估
不断增加的定义
更一致的表现
不断增加的生长及生产力
更好地控制生理反应
高灵敏度检测细胞内的中介体


无血清培养注意事项

总体而言,无血清培养系统中的细胞对于极端的pH值、温度、渗透压、机械力和酶处理更为敏感。

抗生素
最好不要在无血清培养基中使用抗生素 If you do, we recommend that you use 5- to 10-fold less than you would in a serum-supplemented medium. This is because serum proteins tend to bind a certain amount of the antibiotic added; without these serum proteins the level of antibiotic may be high enough to be toxic to certain cells.

Higher density
Cells must be in the mid-logarithmic phase of growth, with viability >90% prior to adaptation. 连续适应性可能是必需的。

切换无血清培养基时,每次传代均采用较高的密度接种细胞可能会有帮助。 由于转入新的培养环境后部分细胞可能无法存活,因此增加接种细胞总数就能增加传代后活细胞的数量。

凝集
细胞凝集通常发生于使用无血清培养基(SFM)时。 我们推荐,对细胞传代时,轻轻磨碎细胞块来分散细胞。

形态
切换无血清培养基过程中以及切换后,偶尔会发生细胞形态的轻微改变。 只要细胞倍增时间和活力正常,则不必在意细胞形态的轻微改变。

 

 


无血清培养基一些基本配方

1 、基本 适应于神经细胞,干细胞,PC12细胞
葡萄糖          0.6% 
谷氨酰胺         2mM 
NaHCO3            3mM 
Hepes            5mM 
胰岛素      2.5mg/ml 
转铁蛋白    100ng/ml 
孕 酮           20nM 
丁二胺         60mM 
硒酸钠          30nM 
青霉素       50mg/ml
链霉素       50mg/ml 
最后用DF12添加到100ml。

2.  基本 适应于各类小鼠胚胎癌细胞系培养基
NaHCO3              2.4g
HEPES(1.5M)      10.0ml
硒酸(5 X 10-6M )   10.0mg
纤粘连蛋白       1ug/cm2 (37度作用15-30分钟)
胰岛素          1000.0mg
转铁蛋白        5000.0mg
青霉素           50mg/ml
链霉素           50mg/ml 

DMEM/F12 1:1混合添加到1000ml。

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