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干细胞搜网 / 2014-03-03
StemRD 是美国一家聚焦于尖端干细胞研究的公司,拥有蛋白表达和纯化方面的专利技术,使StemRD能够保证高效的生产那些用传统方法很难得到的重要干细胞因子。
StemRD 拥有被美国FDA认证的可用于GMP生产治疗型多肽的设施。StemRD的实验室也拥有包括组织培养、细胞处理、超离心、超过滤、FPLC、HPLC和LC/MS等一系列先进设备。
其中干细胞研究用生长/分化因子、小分子化合物均包括目前研究较多的WNT/β-catenin、TGF-β、Hedgehog、Notch等信号通路,同时还涉及细胞再生、分化等研究的治疗型多肽类产品以及一些抗体和标记物产品等。
【参与方式】
1.凡是此促销期间将间充质干细胞培养基作用对象(各类间充质干细胞)的实验报告,详细的数据分析及结论投稿(只需要提到易错点供之后的学者借鉴)到干细胞搜网,不仅可以在干细胞搜网金榜题名,前100名客户均可获得奖金500元。---更有机会获得Apple苹果公司最新款的平板电脑 iPad Air
机会多多,不容错过。崭露头角,作为干细胞科研新新达人,本平台都会帮您实现。
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(自填后与客服联系)
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活动分三期进行:分别为3.5~ 5.5;5.5~7.5;7.5~9.5进行,期期活动精彩不停!!!
活动最终解释权由干细胞搜网所有
MesenGro人类间充质干细胞培养基(产品号MGro ,500ml)特点:
- · 无血清,无异种蛋白
- · 化学成分明确
- · 无需昂贵的铺板蛋白
- · 生长分化优于血清培养基
图 1世界第一款无血清MSC培养基MesenGro®
(点图可见实验步骤)
MesenGro®这款培养基与FBS培养基比较的测试结果见图2所示
(点图可见实验步骤)
图2 MesenGro®与FBS培养基的实验比较结果
(点图可见实验步骤)
PSGro人类ES/iPS细保培养基(产品号PSGro,500ml)特点:
无血清,无异种蛋白
化学成分明确
无需滋养层细胞
效能同于市场领先产品
图 3 StemRD iPSC/ESC无血清培养基PSGro®及其特点
图4 PSGro®性能测试结果
无血清 · 无异种蛋白 · 化学成分明确 · 无须昂贵的铺板蛋白 · 生长分化优于血清培养基
纯度高(大于98%) · 化学结构确定(质谱、核磁) · 生物活性有保证
人间充质干细胞无血清培养基 实验操作步骤:
间充质干细胞无血清培养基是 为扩增从骨髓、脐带血或脂肪组织提取的人类间充质干细胞(human mesenchymalstem cells, hMSC)而设计的无血清培养基。该人间充质干细胞培养基化学成分明确,所有组分为化学合成或重组纯化的蛋白,并且无异源蛋白,不含直接从任何动物组织提取成份。因此它不存在批间误差和潜在的动物源性病原体。如果配合使用特定的培养板(见下),还可以省去铺板的工序和时间,免去铺板胶的费用。
一 人间充质干细胞培养基配制:
1. 2‐8℃解冻添加物。
2. 无菌条件下配制100ml间充质干细胞无血清完全培养基。
3.如果需要也可加入抗菌素(自选)。
配制好的间充质干细胞无血清完全培养液(包含基础培养基、添加物、谷氨酸盐)2-8℃ 避光保存,保存期1 个月。
二 培养基的使用:
培养于其它无血清或有血清培养基的MSCs 可以快捷方便地转换到本品中培养。多数情况下,生长状态良好的MSCs直接换液为本品即可。个别情况下,可能需要逐步转换,如按20%,40%,60%,80%,100%依次递增,至最终完全使用本品。
三 StemRD hMSCs细胞的复苏:
1.37℃水浴快速复苏冻融细胞。
2.将细胞转移到无菌50ml离心管中。
3.逐滴向装有1ml细胞液的离心管中加入10ml预先复温的间充质干细胞无血清完全培养基,注意边加边轻轻晃动离心管。
4.将上述混合溶液转移到细胞培养瓶或细胞培养板中。
5.在5%CO2,37℃培养箱中静置培养。
6.培养24h,换液。
7.此后每隔2天换液,直到传代培养。
四 StemRD人间充质干细胞无血清培养基传代培养:
如果使用特定的细胞培养板,如BD PrimariaTM 系列产品或Corning CellBINDTM 系列产品,那么使用本产品培养间充质干细胞是不需要预先铺板。传统的细胞培养瓶和培养板是否无需铺板正在评估中。对于那些还没有被评估的产品或不适用于不预先铺板工序的产品,推荐使用人纤维连接蛋白(Fibronectin)进行铺板。
1.在镜下观察(使用本产品或其它培养基)细胞,确定传代的时间,推荐在细胞量达到70%满的时候传代,不要让细胞超过80%满!
2.预先将0.05%胰酶/0.53mM EDTA和间充质干细胞无血清完全培养基复温到37℃待用。
3.用移液枪吸走旧培养基。
4.用DPBS洗一遍(自选)。
5.加入0.05%胰酶/0.53mM EDTA液以覆盖住细胞表面,推荐室温消化细胞(消化液用量:6孔板每孔约10cm2加入0.5ml,25cm2培养板加入1ml)。
6. 镜下观察细胞,当看见细胞开始从培养板底脱离,轻轻敲击培养板边缘帮助细胞脱落。消化时间为1‐3分钟。
7. 加入2倍于消化液体积的间充质干细胞无血清完全培养基,将细胞悬液收集于15ml离心管中。
8.1200rpm离心10分钟。
9.尽量弃去离心后的上层清液。用间充质干细胞无血清完全培养基重悬细胞。此时可取细胞悬液进行细胞计数。
10.按照3-5X103/cm2密度接种细胞。
11.5%CO2,37℃培养箱中培养。
12.每隔2天换新鲜的间充质干细胞无血清完全培养基。
13.当细胞生长达到70%满时,传代(一般每隔3-4天)。
五 冻存细胞:
1.配制细胞冻存液。
2.离心分离细胞,用冻存液重悬细胞。
3.将冻存管转移到冻存盒中,置于-80℃冰箱。
4.将细胞转移到液氮罐中长期贮存。
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