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磁珠法全血DNA提取试剂盒的具体操作是什么?
干细胞搜网 / 2014-04-16

 

1.裂解  
取抗凝全血到1.5mLEP管中,加入BufferABufferB,混合均匀。然后把EP管置于恒温水箱中温育1520min  
2.结合  
EP管从温育设备中取出,离心后取上清,加入振荡混匀的磁珠结合液,颠倒混匀。将EP管置于磁力架上进行磁分离,弃废液(吸净管盖及管底残液)。  
3.洗涤  
加入洗涤液,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;  
加入洗涤液,点振数次(若有团状或丝状物可增加点振次数及力度),然后磁分离,吸净管盖及管底的残液;  
重复步骤一次;  
室温下开盖干燥。  
4.洗脱  
    加入洗脱液,放置水浴锅中温育后磁分离,小心吸取上清液至新的EP管中,进行下游实验。
磁珠法全血DNA提取试剂盒优势是什么?
1)生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应,能高效提取DNA,满足微量生物样本DNA提取的要求。
2)磁珠表面能够进行化学修饰,从而与DNA进行特异性吸附,去除样品DNA溶液中的抑制物质,如:有机溶剂、去污剂、金属离子、燃料等。
3)生物磁珠表面功能团数量可以控制获得可提取DNA溶液的浓度信息,实现定量的要求。
(4)生物磁珠可以通过特殊的合成工艺使其具有超顺磁特性,因此,能够通过仪器进行自动化操作,满足数据库建设对大批量样本提取的需要,减少人为因素。
5)用时少,操作简单,适用于大多数生物检材。
6)低廉,便于广泛应用。由于纳米生物磁珠合成采用的都是低价无机和有机原料。无须特殊的仪器设备,使得最终的合成和研发成本都很低,符合我国的基本国情和经济现状。
7)适应了建立DNA数据库所需的大量生物样本的提取,为我国DNA数据库的建设铺平了道路,打下了基础。
(8) 不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂,安全无毒,绿色环保。
与传统提取DNA法相比速度更快!纯度更高!一般情况下不需离心操作,单一样品多应在1h内提取完毕。提取结果均能在凝胶电泳中看到明亮、单一的条带。
磁珠法DNA提取试剂盒应用领域是什么?
 DNA提取试剂盒应用于以下领域:分子生物学;医学领域;血站对献血人员的血液筛选;法医学领域;检验检疫领域;农业、林业、畜牧业、海洋生物以及中草药、花卉等领域;生物实验课教学。

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