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MSC间充质干细胞培养基该如何选择
干细胞搜网 / 2014-05-07

培养基是维持体外细胞生存和生长的基本溶液,是组织细胞培养时最重要的条件。常用间充质干细胞培养基大致有: 
 
(1)合成培养基

主要成分为:氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质(核酸降解物、氧化还原剂等)。常用的有:
①199细胞培养基及其改良品种。 1950年由Morgan 等设计,除BSS 外,含有53 种成分,添加适量的血清后,可广泛用于多种细胞培养、病毒学、疫苗生产等。 199 (HB)细胞培养基,主要应用于Vero 细胞、地鼠肾细胞转瓶培养生产狂犬、乙脑等疫苗,具有高缓冲性能,能够有效提高病毒滴度。
②BME细胞培养基。基础Eagle 培养基(Basal Medium Eagle),1955 年由Eagle 设计,BSS+12 种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM 等。
③MEM细胞培养基。低限量Eagle 培养基(Minimal Essential Medium),1959 年修改配方,删去赖氨酸、生物素,增加氨基酸浓度,适合多种细胞单层生长,是一种最基本、适用范围最广的培养基,是一种被广泛应用的培养基。需要注意的是,MEM 细胞培养基有含 Earle's 平衡盐的类型,也有含 Hanks'平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。生产和科研时,应根据实际情况注意选择合适的MEM 细胞培养基。另外,因MEM 培养基营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。
④DMEM细胞培养基及其改良品种。 DMEM 由Dulbecco 改良的Eagle 培养基,各成份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L )。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA 转染的转化细胞培养。例如CHO 细胞表达生产乙肝疫苗、CHO 细胞表达EPO。
⑤IMDM 细胞培养基。 IMDM 是由Iscove's 改良的Eagle 培养基,增加了几种氨基酸和胱氨酸量。可用于杂交瘤细胞培养,以及无血清培养的基础培养基。
⑥RPMI-1640 细胞培养基。 Moore 等人于1967 年在Roswell Park Memorial Institute 研制,针对淋巴细胞培养设计,BSS+21 种氨基酸+维生素11 种等,广泛适于许多种正常细胞和肿瘤细胞,也用做悬浮细胞培养。
⑦Fischer’s细胞培养基。用于白血病微粒细胞培养。
⑧HamF10、F12 细胞培养基。 1963 年、1969 年由Ham 设计,含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F10 适用于仓鼠、人二倍体细胞,F12 适用于CHO 细胞。
⑨DMEM/F12细胞培养基。 DMEM 和F12 细胞培养基按照 1:1 比例混合效果最佳,营养成分丰富,且可以使用较少血清,或作为无血清培养基的基础培养基。

 
(2)低血清细胞培养基

主要应用于VERO 细胞、BHK21 细胞等细胞在转瓶、微载体反应器中的培养。

 
(3)无血清培养基

是设计用来在无血清条件下促使特殊类型的细胞生长或进行专门应用的培养基。需要添加生长因子和或细胞因子,含有个别蛋白或大量蛋白组分。

 
(4)替代天然培养基

培养基中不包含有蛋白、水解产物或未知结构的组分,所有的成分均有已知的化学结构。面对如此多的细胞培养基,对细胞培养基的选用,建议:
①可以查阅相关文献,或在购买细胞株时咨询选用最适合细胞株的培养基,或购买相配套的细胞培养基产品。 
②许多培养基都适合多种细胞株的培养,可以采用现有的培养基进行试验。
③根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 1640;进行细胞杂交、基因转移实验,可选择IMDM。
④结合细胞特性及培养基的培养效能,用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、克隆形成率等指标判断,根据实验结果选择最佳培养基。

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