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美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒 100次英文名称:

美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒 100次
  • 美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒 100次
英文名称:
产品应用: 支原体检测
中国俗称: 支原体检测试剂盒 中国简称: 支原体检测试剂盒
注册品牌: LONZA 生产厂家: Lonza厂家
订购货号: LT07-318A 保存温度: 2~8℃
规格型号: 100T/盒
产品种类: 支原体检测试剂盒
到货时间: 1~5天
产品编码: YS-SO-001507
市场价格: ¥13000元
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产品描述

产品英文名称:MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit
产品中文名称:MycoAlert™支原体检测试剂盒
 

美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒 去除试剂盒产品介绍:
美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒是专门检测细胞培养过程中是否被支原体污染的经典试剂盒,它包含检测所用到的各种试剂和产品操作手册。MycoAlert™支原体检测试剂盒检测原理主要是:细胞培养中存活的支原体被溶解,然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应,将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量,可以得到一个比率,该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在,第二次读数相对于第一次读数就没有增加;如果酶与底物进行特异性反应,就会导致ATP含量上升。最后通过分光光度计读数,由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系,因此可检测支原体的污染问题。同时,该支原体检测试剂盒具有操作简单、快速高效、结果稳定可靠、灵敏度极高等优点,让您在支原体检测时轻松容易,并确保您的培养洁净无污染。
 

LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒产品特性:
» 快速检测:20分钟内即可诊断出你的细胞培养是否健康无污染,而其它方法一般要几个小时到一周的时间
» 应用方便:只需把你的细胞培养物与两种试剂混合配成100µl,在分光光度计上读2次数
» 通用性强:可以检测所有支原体在细胞培养过程中的污染,如支原体属、无胆甾原体属、虫原体属、脲原体属、螺原体属等
» 检测灵敏:可检测<50 cfu/ml的支原体,避免出现像PCR和荧光染色方法出现的阴性结果
» 成分完备:该支原体检测试剂盒包含实验所需的所有试剂,而不像商业PCR检测方法中需要你提供PCR酶、核酸、限制性内切酶和琼脂糖电泳所需的其它试剂
 

MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit英文简述:
The MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit is a selective biochemical test that exploits the activity of mycoplasmal enzymes which are found in all six of the main mycoplasma cell culture contaminants and the vast majority of 180 mycoplasma species, but are not present in eukaryotic cells. Viable mycoplasma in a test sample (cell supernatant) are lysed and the enzymes react with the MycoAlert™ Substrate, catalyzing the conversion of ADP to ATP. The ATP is then transferred into a light signal via the luciferase enzyme in the MycoAlert™ Reagent. By measuring the level of ATP in a sample both before (read A) and after the addition of the MycoAlert™ Substrate (read B), a ratio can be obtained which is indicative of the presence or absence of mycoplasma.
Convenient & fast
• Simply add two reagents to the culture supernatant
• Perform two luminescence readings
• Easy interpretation of results
• Results in < 20 min
Universal
• Detects all common mollicute contaminations (Mycoplasma, Acholeplasma, Entomoplasma and Spiroplasma; except Ureaplasma)
• Negligible interference with media components
 

支原体的危害:
支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm),是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者,会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉,因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。
污染实验室培养细胞的支原体主要有八种,但还没有哪种检测方法能够单枪匹马把这八种支原体都检测出来。支原体非常顽强,通常用于细胞培养的绝大多数抗生素都对其无效。例如青霉素主要作用于细菌细胞壁,但支原体没有细胞壁因此就不受影响。无懈可击的细胞培养技术始终是预防支原体感染的最佳方式,另外及时找出受到支原体感染的培养物也很重要,这样才能在感染扩散前快速采取有效措施。本文就为你介绍了几种在培养细胞中检测支原体的常用方法。
 

实验室支原体检测方法:
分离培养法
分离培养法是支原体检测的金标方法,其检测精确度最高。这种方法是从可疑的细胞培养体系中取样,并接种到最适宜支原体生长的琼脂平板上。如果样本中含有支原体,它们就会在这种琼脂平板上疯狂生长,最终形成明显可见的特征性菌落。分离培养法基本不会出现假阴性结果,因此被誉为支原体检测金标准。不过分离培养法也存在两个弊端,一是检测时间太长,支原体要长出明显克隆至少需要4周时间。二是尽管可以检测绝大多数支原体种类,分离培养法也有力所不及的时候,例如支原体M. hyorhinis。
如果你实在不想等这么久,或者希望在分离培养法的等待过程中先拿到初步结果,你可以试一试DNA、PCR或酶学检测方法。不过需要注意的是,上述检测方法都不能单独检出所有类型的支原体,而且灵敏度也没有分离培养法高,所以最好结合使用两种方法以获得最可靠的检测结果。
DNA检测
DNA检测需要将可疑样品与指示细胞共同培养,因此一般需要几天时间。DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞,如果原样本中含有支原体,那么当细胞DNA被荧光染料(如Hoechst染料)染色时,就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。分离培养法用来检测支原体M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以准确的将其检测出来。
PCR法
PCR法也可以检测M. hyorhinis菌株,PCR法检测支原体只需几个小时,是最快但也是最不灵敏的支原体检测方法。该方法采用针对支原体DNA的引物用PCR检测可疑样本,其中PCR引物通常针对支原体的16S rRNA基因。在凝胶电泳过程中,支原体DNA会显示为特异性条带,以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体,但谨慎起见最好同时使用另一种检测方法来进行验证。
酶学检测和ELISA
此外,也还存在一些其他支原体检测方法。例如酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中,在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化为ATP,随后能利用ATP发光的luciferase酶就可以指示支原体的存在。ELISA也能用于支原体检测,以ELISA法为基础的支原体检测一般使用针对支原体16S rRNA基因的带标记探针或抗体,来检测培养物中是否含有支原体。
定期检测
支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎,因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。将定期支原体检测常规化坚持下去,是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。
 

临床支原体诊断:
支原体实验室检测方法有:形态学检查、支原体培养、抗原检测、血清学方法和分子生物学方法。解脲支原体MB抗原的研究表明:MB抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原,具有种特异性,包含血清特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基、N端1/3为保守区,包含群特异的抗原决定簇:C端2/3是由重复序列组成的可变区,包含型特异的抗原决定簇,对该抗原的研究及对于研究疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面,N端固定于膜上使C端重复区暴露于微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础,C端最可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应,是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系,以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。
测定支原体抗体的血清学试验方法中,有支原体特异性血清学检测和非特异性血清学检测:支原体特异性血清学检测方法中,最常用的是补体结合试验,另有间接免疫荧光染色检查法、生长抑制试验、代谢抑制试验、间接血凝试验、酶免疫法和酶联免疫吸附试验(ELISA)等。支原体的非特异血清学方法有肺炎支原体冷凝集试验与MG链球菌凝集试验,对支原体肺炎能起辅助诊断的作用。检测特异性抗体IgG的方法尚不能达到早期快速诊断的目的,抗原的检测为今后研究的发展方向。已有用酶联免疫吸附试验、荧光标记抗体、肺炎支原体膜蛋白单克隆抗体和反向间接血凝法直接检测分泌物和体液中支原体抗原的报道,具有很高的特异度和灵敏度。人体感染肺炎支原体后,能产生特异性IgM和IgG类抗体。IgM类抗体出现早,一般在感染后1周出现,3~4周达高峰,以后逐渐降低。由于肺炎支原体感染的潜伏期为2~3周,当患者出现症状而就诊时,IgM抗体已达到相当高的水平,因此IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标。如IgM抗体阴性,则不能否定肺炎支原体感染, 需检测IgG抗体。IgG较IgM出现晚,需动态观察,如显著升高提示感染,显著降低说明处于感染后期。·PCR技术检测为进一步早期诊断MP感染提供可能。应用PCR的敏感性和探针杂交的特异性合二为一,是目前公认的准确性和重复性最好的检测。
 

美国LONZA LT07-318 广谱支原体检测试剂盒 去除试剂盒系列产品及其他Lonza产品订购信息:
LONZA  LT07-118  Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 广谱支原体检测试剂盒     10T/盒 
LONZA  LT07-218  Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 广谱支原体检测试剂盒     25T/盒 
LONZA  LT07-318  Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 广谱支原体检测试剂盒     100T/盒 
LONZA  LT07-418  Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit 广谱支原体检测试剂盒     50T/盒 
LONZA  LT07-518  Lonza MycoAlert Assay Control Set 质控对照品     10T/盒 
LONZA  LT07-701  Lonza MycoAlert Plus支原体检测试剂盒     10T/盒 
LONZA  LT07-703  Lonza MycoAlert Plus支原体检测试剂盒     30T/盒 
LONZA  LT07-705  Lonza MycoAlert Plus支原体检测试剂盒            50T/盒 
LONZA  LT07-710  Lonza MycoAlert Plus支原体检测试剂盒     100T/盒 
LONZA  LT37-701  Lonza MycoAlert Plus检测对照试剂盒     10T/盒
LONZA   LT07-818  Lonza MycoZap1支原体去除试剂盒     1T/盒 
LONZA  LT07-918  Lonza MycoZap5 支原体去除试剂盒     5T/盒
LONZA   AAL-1001        Lonza Lucetta™ Luminometer 支原体检测光度计仪器                         1台/箱
LONZA  50152  LONZA SeaKem® Gold Agarose 金琼脂糖粉     25g/瓶 
LONZA  50150  LONZA SeaKem® Gold Agarose 金琼脂糖粉     125g/瓶 
LONZA  50302  LONZA SeaPrep® Agarose 超低熔点琼脂糖粉     25g/瓶 
LONZA  50101  LONZA SeaPlaque® Agarose 低熔点琼脂糖粉     25g/瓶 
LONZA  50090  LONZA NuSieve 3:1 Agarose 琼脂糖粉      125g/瓶 
LONZA  VCA-1003  LONZA Cell Line Nucleofector® Kit V转染盒     25次/盒 
LONZA  V4XC-1024  LONZA SE Cell Line 4D X Kit L(24RCT)转染盒     24次/盒 
LONZA 17-605E   Lonza L-Glutamine 200mM L-谷氨酰胺     100mL/瓶 

 

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